Baile > Nuacht > Nuacht Tionscail

Ceisteanna agus freagraí coitianta in ullmhú tuaslagáin thiocyanate guanidine

2021-09-16

Is denaturant próitéin láidir é thiocyanate Guanidine. Ní amháin gur féidir leis próitéiní a thuaslagadh go tapa, ilroinnt struchtúr cille a bheith mar thoradh air, agus próitéiní núicléacha a scaradh go tapa ó aigéid núicléacha mar gheall ar scriosadh struchtúr tánaisteach, ach tá éifeacht láidir dínádúraithe aige ar RNases freisin. Dá bhrí sin, is féidir guanidine thiocyanate a úsáid mar dhínádúrú chun cealla a scriosadh, RNA a scaradh ó phróitéin, agus RNA a scaoileadh i dtuaslagán. Mar sin féin, is minic a bhíonn fadhbanna áirithe ag ullmhú agus ag úsáid tuaslagán thiocyanate guanidine. Freagróidh an páipéar seo na fadhbanna seo ceann ar cheann.

 

An gá tuaslagán thiocyanate guanidine a úsáid agus a ullmhú anois?

 

Ba é an tiúchan deiridh de thiocyanáit guanidine ná 4m mar shampla: citrate sóidiam 42mm, sarcosine sóidiam 0.83% (sóidiam sóidiam, n-meitiolglycín), 0.2mm β- Maolán CSB a ullmhú ó mercaptoethanol; Déantar 25g thiocyanate guanidine agus tuaslagán maolánach 33ml CSB a mheascadh go dtí go ndíscaoiltear go hiomlán é. Is féidir an tuaslagán dínádúraithe a ullmhú trí théamh agus tuaslagtha ag 65agus stóráilte ag 4le haghaidh fuireachais.

 

Dá bhrí sin, ní gá tuaslagán thiocyanate guanidine a úsáid agus a ullmhú anois, agus tá réitigh de thiúchan éagsúla ar an margadh faoi láthair, ach ní furasta an t-am stórála a bheith ró-fhada, ar shlí eile beidh deascadh ann, a chaithfidh a bheith. seiceáil go cúramach roimh úsáid; Ina theannta sin, má tá an iomarca ullmhúcháin aon-uaire ann, moltar athphacáil a dhéanamh.

 

An bhfuil steiriliú de dhíth ar thuaslagán thiocyanate guanidine tar éis é a ullmhú?

 

Ní gá tuaslagán thiocyanáit guanidine a steiriliú, nach bhfuil an-chobhsaí, agus go ginearálta úsáidtear uisce DEPC 0.1% le tuaslagán pirealú, agus rinneadh an t-uisce a steiriliú. Ina theannta sin, is gá gach imoibrí chun RNA a eastóscadh a ullmhú le huisce DEPC, agus ba cheart an t-imoibrí a oscailt as an nua agus a úsáid go heisiach le haghaidh RNA.

 

Cé nach gá an lysate ullmhaithe a steiriliú, ba chóir a thabhairt faoi deara go bhfuil na táirgí plaisteacha a úsáideadh sa turgnamh marcáilte saor ó RNase. Mura n-osclaíodh iad le húsáid, is féidir iad a úsáid go díreach. Caithfear daoine eile a chóireáil: cuir DEPC in uisce driogtha dúbailte chun a thiúchan deiridh a dhéanamh 0.1%, sáithigh na táirgí plaisteacha ann, déan an chistin a aeráil thar oíche, agus ansin iad a shéalú le scragall alúmanaim, Teocht ard agus steiriliú ardbhrú ar feadh 30 nóiméad ar a laghad, tirim agus fuireachas.